PCR cuantitativa para la deteccin̤ del virus de la tristeza de los ct̕ricos en Colombia
Se aplic ̤la tčnica de reaccin̤ en cadena de la polimerasa en tiempo real (qRT-PCR), usando SYBR Green para la deteccin̤ especf̕ica del virus de la tristeza de los ct̕ricos (CTV) en Colombia. Una pareja de iniciadores, diseądos a partir de secuencias conservadas en los marcos abiertos de lectura (...
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| Summary: | Se aplic ̤la tčnica de reaccin̤ en cadena de la polimerasa en tiempo real (qRT-PCR), usando SYBR Green para la deteccin̤ especf̕ica del virus de la tristeza de los ct̕ricos (CTV) en Colombia. Una pareja de iniciadores, diseądos a partir de secuencias conservadas en los marcos abiertos de lectura (ORF́<U+0099>s) 1b y 2, permiti ̤amplificar el ARN genm̤ico (ARNg), y un producto de 186 pb fue obtenido sin la presencia de dm̕eros o inespecificidad. El anl̀isis de la curva de fusin̤ mostr ̤un pico entre 81 oC y 83 oC, con un coeficiente de correlacin̤ de 0,998 y una eficiencia de 99,1 %. La curva estǹdar se desarroll ̤a partir de una amplificacin̤ del producto de 186 pb y permiti ̤realizar un anl̀isis cuantitativo de las muestras, con un rango de deteccin̤ de 1x108 hasta 1x103 copias de RNAg y con valores de coeficiente de variacin̤ bajos. La acumulacin̤ de CTV fue ms̀ alta en tejido foliar y en frutos que en corteza; entretanto, las diferencias demostradas entre varias especies de ct̕ricos susceptibles a la infeccin̤ fueron mn̕imas. Los resultados de este trabajo muestran que la mayor concentracin̤ de virus se encontr ̤en el tercio superior de las plantas analizadas, seguida por el tercio bajo y, por l͠timo, el tercio medio. La qRT-PCR es un mťodo especf̕ico y sensible de interš prc̀tico en los procesos de deteccin̤ de las enfermedades virales presentes en el cultivo de los ct̕ricos y otros cultivos de interš comercial. |
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| ISBN: | 0122-8420 (versin̤ impresa) |