Characterization of recombinant human lysosomal beta-hexosaminidases produced in the methylotrophic yeast Pichia pastoris
Las <U+00CE>ø-hexosaminidasas (Hex) son enzimas dimřicas involucradas en la degradacin̤ lisosomal de glicolp̕idos y glicanos. Estas enzimas estǹ formadas por las subunidades <U+00CE>ł- y/o <U+00CE>ø-codificadas por los genes HEXA and HEXB respectivamente. Las mutaciones de estos...
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| Médium: | Kniha |
| Jazyk: | angličtina |
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| On-line přístup: | Characterization of recombinant human lysosomal beta-hexosaminidases produced in the methylotrophic yeast Pichia pastoris |
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| Shrnutí: | Las <U+00CE>ø-hexosaminidasas (Hex) son enzimas dimřicas involucradas en la degradacin̤ lisosomal de glicolp̕idos y glicanos. Estas enzimas estǹ formadas por las subunidades <U+00CE>ł- y/o <U+00CE>ø-codificadas por los genes HEXA and HEXB respectivamente. Las mutaciones de estos genes conducen a las enfermedades de Tay Sachs o Sandhoff, que son desr̤denes neurodegenerativos causados por la acumulacin̤ de glicolp̕idos no degradados. Aunque las Hex derivadas de tejido han sido ampliamente caracterizadas, la informacin̤ disponible sobre las <U+00CE>ø-hexosaminidasas recombinantes es limitada. En este estudio se produjeron Hex recombinantes lisosomales (rhHex-A, rhHex-B y rhHex-S) en la levadura metilotrf̤ica Pichia pastoris GS115. Las actividades especf̕icas ms̀ altas de las enzimas fueron 13.124, 12.779, 14.606 U .mg-1 para rhHex-A, rhHex-B y rhHex-S, respectivamente. Estos resultados fueron 25 a 50 veces ms̀ altos que los obtenidos de leucocitos humanos normales. Las proten̕as se purificaron y se caracterizaron a diferentes condiciones de pH y temperatura. Todas las proten̕as fueron estables a pH c̀ido y a 4ʻC y 37ʻC. A 45ʻC la rhHex-S se inactiv ̤completamente, mientras que rhHex-A y rhHex-B mostraron alta estabilidad. Este estudio demuestra el potencial de P. pastoris GS115 para la produccin̤ de enzimas lisosomales polimřicas y presenta la caracterizacin̤ de distintas <U+00CE>ø-hexosaminidasas recombinantes producidas en un n͠ico hospedero. |
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| ISBN: | 0122-7483 (versin̤ impresa) ; 2027-1352 (versin̤ online) |